Protein Koncentration Kalkulator

Kategori: Biologi
- marts 21, 2025
| |
Typiske værdier ligger mellem 0.5 og 2.0
Standardkuvetter har en lysvej på 1 cm
Hvis prøven blev fortyndet før måling (f.eks. 5 = 1:5 fortynding)

Koncetrationen af protein ved hjælp af absorbans ved 280 nm (A280) bestemmes ved hjælp af Beer-Lambert loven:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

hvor:

  • \( C \) = Protein koncentration (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbans ved 280 nm
  • \( \epsilon \) = Ekstinktionskoefficient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Vejlængde af cuvetten (cm)

Hvad er Protein Koncentrationsberegneren?

Protein Koncentrationsberegneren hjælper med at bestemme protein koncentration ved hjælp af forskellige metoder, herunder:

  • Absorbans ved 280 nm (A280): En hurtig og ikke-destruktiv metode baseret på aromatiske aminosyrer.
  • Bradford Assay: En kolorimetrisk metode, der bruger farvebinding.
  • BCA (Bicinchoninsyre) Assay: En metode, der er baseret på kobberreduktion og kolorimetrisk detektion.
  • Lowry Assay: En veletableret tilgang, der bruger protein-kobber interaktioner.

Sådan bruger du beregneren

Følg disse trin for at beregne protein koncentration:

  • Vælg målemetoden (A280, Bradford, BCA eller Lowry).
  • Indtast de nødvendige værdier såsom absorbans, fortyndingsfaktor og ekstinktionskoefficient (hvis nødvendigt).
  • Hvis du bruger en standardkurve metode (Bradford, BCA eller Lowry), indtast kurveparametrene.
  • Klik på "Beregn" knappen for at få koncentrationsresultatet.

Fordele ved at bruge beregneren

  • Sparer tid ved at automatisere koncentrationsberegninger.
  • Understøtter flere målemetoder for fleksibilitet.
  • Inkluderer en fortyndingsberegner til forberedelse af specifikke koncentrationer.
  • Reducerer menneskelige fejl i manuelle beregninger.

Ofte stillede spørgsmål

1. Hvor præcis er Absorbans (A280) metoden?

A280 metoden er generelt præcis for rene proteiner, men kan påvirkes af forureninger som nukleinsyrer.

2. Kan jeg bruge Bradford Assay til alle proteiner?

Bradford Assay fungerer godt for de fleste proteiner, men kan give variable resultater afhængigt af proteinets sammensætning.

3. Hvad er fordelen ved BCA Assay?

BCA metoden er mere kompatibel med sæber og har et bredere lineært område end Bradford.

4. Hvordan vælger jeg den korrekte ekstinktionskoefficient for A280?

Brug offentliggjorte værdier for kendte proteiner, eller beregn ekstinktionskoefficienten baseret på aminosyresammensætning.

5. Hvorfor har jeg brug for en fortyndingsfaktor?

Hvis din prøve er fortyndet før måling, skal du multiplicere den beregnede koncentration med fortyndingsfaktoren for at opnå den korrekte endelige koncentration.